Биз өткөн аптада целлюлоза ацетаты мембранасынын электрофорезин колдонуу боюнча бир нече ойлорду бөлүштүк жана бул теманы бүгүн сиздин маалыматыңыз үчүн бүтүрөбүз.
Тандоо Буфердин концентрациясы
Целлюлоза ацетаты мембраналык электрофорезде колдонулган буфердин концентрациясы кагаз электрофорезинде колдонулгандан төмөн.Көбүнчө колдонулган рН 8.6Bарбиталдык буфер адатта 0,05 моль/лден 0,09 моль/лге чейинки диапазондо тандалат.Концентрацияны тандоодо алдын ала аныктама жүргүзүлөт.Мисалы, электрофорез камерасындагы электроддордун ортосундагы мембрана тилкесинин узундугу 8-10см болсо, мембрананын узундугунун бир сантиметрине 25В чыңалуу керек, ал эми токтун интенсивдүүлүгү мембрананын туурасынын сантиметрине 0,4-0,5 мА болушу керек.Эгерде электрофорез учурунда бул көрсөткүчтөр жетишпесе же ашып кетсе, буфердин концентрациясын көбөйтүү же суюлтуу керек.
Өтө төмөн буфер концентрациясы тилкелердин тез кыймылына жана тилке туурасынын көбөйүшүнө алып келет.Башка жагынан алганда, өтө жогору буфер концентрациясы тилкелердин миграциясын жайлатып, айрым бөлүү тилкелерин айырмалоону кыйындатат.
Белгилей кетчү нерсе, целлюлоза ацетат мембранасынын электрофорезинде токтун олуттуу бөлүгү үлгү аркылуу өткөрүлөт, ал бир топ жылуулукту пайда кылат.Кээде тандалган буфердик концентрация ылайыктуу деп эсептелиши мүмкүн.Бирок, айлана-чөйрөнүн температурасы жогорулаган шарттарда же жогорку чыңалуу колдонулганда, ысыктан улам суунун бууланышы күчөп, буфердик концентрация өтө жогору болуп, ал тургай мембрананын кургап кетишине алып келиши мүмкүн.
Үлгү көлөмү
Целлюлоза ацетат мембранасынын электрофорезинде үлгү көлөмүнүн өлчөмү ар кандай факторлор менен, анын ичинде электрофорездин шарттары, үлгүнүн өзүнүн касиеттери, боёо ыкмалары жана аныктоо ыкмалары менен аныкталат.Жалпы принцип катары, аныктоо ыкмасы канчалык сезимтал болсо, үлгү көлөмү ошончолук аз болушу мүмкүн, бул бөлүү үчүн пайдалуу.Эгерде үлгү көлөмү ашыкча болсо, электрофоретикалык бөлүү схемалары ачык-айкын болбой калышы мүмкүн, ошондой эле боёо да көп убакытты талап кылышы мүмкүн.Бирок, элиюциялык колориметрдик аныктоо ыкмаларын колдонуу менен бөлүнгөн боёк тилкелерин сандык жактан талдоодо үлгүнүн көлөмү өтө аз болбошу керек, анткени бул айрым компоненттер үчүн абсорбенттик маанилердин төмөн болушуна алып келиши мүмкүн, бул алардын мазмунун эсептөөдө чоң каталарга алып келиши мүмкүн.Мындай учурларда, үлгү көлөмү тиешелүү түрдө көбөйтүлүшү керек.
Адатта, үлгүнү колдонуу линиясынын ар бир сантиметрине кошулган үлгү көлөмү 0,1ден 5 мклге чейин, 5тен 1000 мкгга чейинки үлгү көлөмүнө барабар.Мисалы, күнүмдүк сыворотка протеининин электрофорезин талдоодо, колдонуу линиясынын ар бир сантиметрине кошулган үлгү көлөмү жалпысынан 1 мкл ашпайт, бул 60-80 мкг протеинге барабар.Бирок, ошол эле электрофорез ыкмасын колдонуу менен липопротеиндерди же гликопротеиндерди талдоодо, үлгү көлөмүн тиешелүү түрдө көбөйтүү керек.
Жыйынтыктап айтканда, эң ылайыктуу үлгү көлөмү алдын ала эксперименттердин сериясы аркылуу белгилүү бир шарттардын негизинде тандалышы керек.
Боёк эритмесин тандоо
Целлюлоза ацетат мембранасынын электрофорезиндеги бөлүнгөн тилкелер, адатта, аныктоого чейин боёлот.Ар кандай үлгү компоненттери ар кандай боёо ыкмаларын талап кылат, жана целлюлоза ацетат мембрана электрофорез үчүн ылайыктуу боёо ыкмалары толугу менен чыпка кагазы үчүн колдонулушу мүмкүн эмес.
Боёк үчүн чечим тандоо үчүн үч негизги принцип барцеллюлоза ацетат мембранасы.Биринчиден,Спиртте эрүүчү боёкторго караганда сууда эрүүчү боёкторго артыкчылык берүү керек, алардын боёгуч эритмесинен келип чыккан мембрана кичирейүүсүн жана деформациясын болтурбоо керек.Боёгондон кийин кабыкчаны суу менен жууп, боёо мөөнөтүн азайтуу маанилүү.Болбосо, мембрана ийри же кичирейип калышы мүмкүн, бул кийинки аныктоого таасирин тийгизет.
Экинчиден, үлгү үчүн күчтүү боёк жакындык менен боёкторду тандап алуу артык.Сыворотка белокторунун целлюлоза ацетаты мембранасынын электрофорезинде кара аминокислота 10В көбүнчө кандын ар кандай белок компоненттерине күчтүү боёо жакындыгы жана анын туруктуулугу үчүн колдонулат.
Үчүнчүдөн, ишенимдүү сапаттуу боёкторду тандоо керек.Кээ бир боёктор, ошол эле аталышка ээ болгонуна карабастан, боёгондон кийин өзгөчө караңгы фонго алып келген кирлерди камтышы мүмкүн.Бул алгач жакшы бөлүнгөн тилкелерди бүдөмүктөп, аларды айырмалоону кыйындатат.
Акырында, боёк эритмеси концентрациясын тандоо маанилүү.Теориялык жактан алганда, боёгуч эритменин концентрациясынын жогору болушу үлгү компоненттеринин кылдат боёшуна жана жакшы боёо натыйжаларына алып келет окшойт.Бирок, бул андай эмес.Үлгү компоненттери менен боёктун ортосундагы байланыштын жакындыгы белгилүү бир чекке ээ, ал боёо эритмесинин концентрациясынын жогорулашы менен көбөйбөйт.Тескерисинче, боёгуч эритменин өтө жогору концентрациясы боёкту текке кетирбестен, так фонго жетишүүнү кыйындатат.Мындан тышкары, түс интенсивдүүлүгү белгилүү бир максималдуу мааниге жеткенде, боёктун сиңирүү ийри сызыктуу байланышты карманбайт, айрыкча сандык өлчөөдө. Целлюлоза ацетаты мембранасынын электрофорезинде, боёо эритмесинин концентрациясы кагаз электрофорезинде колдонулгандан көбүнчө төмөн.
Пекин Liuyi биотехнология жөнүндө билүү үчүн чоо-жайы's целлюлоза ацетат мембранасыэлектрофорез цистернасы жана анын электрофорез колдонмосу, бул жерге кириңиз:
лЦеллюлоза ацетаты мембранасы менен сыворотка протеиндерин бөлүү боюнча эксперимент
лЦеллюлоза ацетаты мембраналык электрофорез
лЦеллюлоза ацетаты мембраналык электрофорезди колдонууда бир нече ойлорду эске алуу керек (1)
Биздин өнүмдөрдү сатып алуу планыңыз болсо, биз менен байланышуудан тартынбаңыз.Сиз бизге электрондук почта аркылуу билдирүү жөнөтө аласыз[email protected]же[email protected], же +86 15810650221 номерине чалыңыз же Whatsapp +86 15810650221, же Wechat: 15810650221 номерин кошуңуз.
Шилтеме:Ли мырзанын электрофорез (Экинчи басылышы).
Посттун убактысы: 06-июнь-2023