Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) негизинен жеке клеткаларда ДНКнын бузулушун жана оңдоону аныктоо үчүн колдонулган сезгич жана тез ыкма. "Comet Assay" аталышы натыйжаларда пайда болгон мүнөздүү комета сымал формадан келип чыккан: клетканын ядросу "башты" түзөт, ал эми бузулган ДНК фрагменттери кометага окшош "куйрукту" жаратып, көчүп кетет.
Принцип
Комета анализинин принциби электр талаасында ДНК фрагменттеринин миграциясына негизделген. Бүтүлбөгөн ДНК клетканын ядросунда калат, ал эми бузулган же фрагменттелген ДНК анодду көздөй көчүп, кометанын “куйругун” түзөт. Куйруктун узундугу жана интенсивдүүлүгү ДНКнын бузулушунун көлөмүнө түз пропорционалдуу.
Процедура
- Клетка даярдоо: Текшере турган клеткалар эрүү температурасы төмөн агароза менен аралаштырылып, микроскоптун слайддарына жайылып, бирдиктүү катмар пайда болот.
- Клетка лизиси: Слайддар ДНКны ачып, клетка кабыкчасын жана ядролук кабыкчасын алып салуу үчүн лизис эритмесине чөмүлдүрүлөт.
- Электрофорез: Слайддар щелочтуу же нейтралдуу шарттарда электрофорез камерасына жайгаштырылат. Бузулган ДНК фрагменттери электр талаасынын таасири астында оң электродду көздөй жылат.
- Боёо: Электрофорезден кийин слайддар ДНКны визуалдаштыруу үчүн флуоресценттик боёк (мисалы, этидий бромиди) менен боёлот.
- Микроскопиялык анализ: Флуоресценттик микроскоптун же атайын программалык камсыздоонун жардамы менен кометалардын фигуралары талданат жана куйруктун узундугу жана интенсивдүүлүгү сыяктуу параметрлер өлчөнөт.
Biorenderден сүрөт
Маалыматтарды талдоо
Комета анализинин натыйжалары бир нече негизги параметрлердин негизинде бааланат:
- Куйрук узундугу: ДНКнын бузулушунун көлөмүн көрсөтүү менен, ДНК көчүп кеткен аралыкты билдирет.
- Куйрук ДНК мазмуну: Көбүнчө ДНКнын бузулушунун сандык өлчөмү катары колдонулган куйрукка өтүүчү ДНКнын пайызы.
- Olive Tail Moment (OTM): ДНКнын бузулушунун кеңири өлчөмүн камсыз кылуу үчүн куйруктун узундугу менен куйрук ДНК мазмунун бириктирет.
Тиркемелер
- Генотоксикалык изилдөөлөр: Comet Assay химиялык заттардын, дары-дармектердин жана радиациянын клетка ДНКсына тийгизген таасирин баалоо үчүн кеңири колдонулат, бул аны генотоксиктүүлүгүн текшерүү үчүн негизги куралга айландырат.
- Экологиялык токсикология: Бул экологиялык булгоочу заттардын организмдердин ДНКсына тийгизген таасирин анализдөөгө жардам берип, экосистеманын коопсуздугу боюнча түшүнүктөрдү берет.
- Медициналык жана клиникалык изилдөөлөр: Comet Assay ДНКны оңдоо механизмдерин, ракты жана башка ДНКга байланыштуу ооруларды изилдөөдө колдонулат. Ал ошондой эле радиотерапия жана химиотерапия сыяктуу ракты дарылоонун ДНКга тийгизген таасирине баа берет.
- Тамак-аш жана айыл чарба илимдери: Пестициддердин, тамак-аш кошулмаларынын жана башка заттардын коопсуздугун баалоо жана жаныбарлардын моделдеринде алардын уулуу таасирин изилдөө үчүн колдонулат.
Артыкчылыктары
- Жогорку сезгичтик: ДНКнын бузулушунун төмөн деңгээлин аныктоого жөндөмдүү.
- Жөнөкөй операция: Техника жөнөкөй болгондуктан, аны жогорку өндүрүмдүүлүктөгү скрининг үчүн ылайыктуу кылат.
- Кеңири колдонмо: Бул ар кандай клетка түрлөрүнө, анын ичинде жаныбарлардын жана өсүмдүктөрдүн клеткаларына колдонулушу мүмкүн.
- Сандык аныктоо көйгөйлөрү: ДНКнын бузулушу боюнча сапаттык маалыматтарды берүү менен, сандык талдоо программалык камсыздоо жана сүрөт талдоо ыкмаларына таянат.
- Эксперименттик шарттар: Натыйжаларга электрофорез убактысы жана рН сыяктуу факторлор таасир этиши мүмкүн, эксперименталдык шарттарды кылдат контролдоону талап кылат.
Чектөөлөр
Comet Assay ийкемдүүлүгүнө жана ДНКнын бузулушун аныктоодо жана оңдоодо жогорку сезгичтигинен улам биомедициналык изилдөөдө, экология илиминде жана дарыларды иштеп чыгууда баа жеткис курал болуп саналат. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)комета анализи үчүн горизонталдуу электрофорез камерасын сунуш кылат. жөнүндө талкуулоо үчүн биз менен байланышууга кош келиңизComet Assayпротокол.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) өз кесиптик техникалык командасы жана R & D борбору менен 50 жылдан ашуун электрофорез аспаптарын өндүрүү боюнча адистешкен. Бизде дизайндан текшерүүгө жана кампага чейин ишенимдүү жана толук өндүрүш линиясы, ошондой эле маркетингдик колдоо бар. Биздин негизги өнүмдөр - Электрофорез клеткасы (танк/камера), электрофорез энергиясы, көк LED Transilluminator, UV Transilluminator, гель сүрөтү жана анализ системасы ж.б. Биз ошондой эле ПТР инструменти, вортекс аралаштыргыч жана лаборатория үчүн центрифуга сыяктуу лабораториялык шаймандар менен камсыз кылабыз.
Биздин өнүмдөрдү сатып алуу планыңыз болсо, биз менен байланышуудан тартынбаңыз. Сиз бизге электрондук почта аркылуу билдирүү жөнөтө аласыз[email protected]же[email protected], же +86 15810650221 номерине чалыңыз же Whatsapp +86 15810650221, же Wechat: 15810650221 номерин кошуңуз.
Сураныч, Whatsapp же WeChat'ка кошуу үчүн QR кодун сканерлеңиз.
Посттун убактысы: 20-сентябрь 2024-ж