Гель электрофорезин оптималдаштыруу: үлгү көлөмү, чыңалуу жана убакыт үчүн мыкты тажрыйбалар

Introduction

Гель электрофорези - молекулярдык биологиядагы фундаменталдуу ыкма, белокторду, нуклеиндик кислоталарды жана башка макромолекулаларды бөлүү үчүн кеңири колдонулат. Үлгү көлөмүн, чыңалууну жана электрофорез убактысын туура көзөмөлдөө так жана кайталануучу натыйжаларга жетишүү үчүн өтө маанилүү.Биздин лабораториядагы кесиптешибиз сунуш кылатSDS-PAGE гел электрофорез учурунда бул параметрлерди башкаруу үчүн мыкты тажрыйбалар.

3

Пекин Liuyi Biotechnology гел электрофорез азыктары

Үлгү көлөмү: ырааттуулукту камсыз кылуу

SDS-PAGE электрофорезин аткарып жатканда, үлгү көлөмү сиздин натыйжаларыңыздын чечилишине олуттуу таасир эте турган негизги фактор болуп саналат. Жалпысынан бир скважинага 10 мкл жалпы протеинди жүктөө сунушталат. Консистенцияны камсыз кылуу жана чектеш скважиналардын ортосунда үлгүлөрдүн диффузиясын болтурбоо үчүн, бардык бош скважиналарга бирдей көлөмдөгү 1x жүктөө буферин жүктөө маанилүү. Бул чара скважина бош калганда пайда болушу мүмкүн болгон кошуна тилкелерге үлгүлөрдүн жайылышынын алдын алууга жардам берет.

Үлгүлөрдү жүктөөдөн мурун, ар дайым бир кудукка молекулярдык салмак белгисин кошуу менен баштаңыз. Бул электрофорезден кийин белоктун өлчөмүн оңой аныктоого мүмкүндүк берет.

1

Voltage Control: Тез салмактуулук жана чечим

Электрофорез учурунда колдонулган чыңалуу, үлгүлөрдүн гел аркылуу өтүү ылдамдыгына да, бөлүүнүн чечилишине да түздөн-түз таасир этет. SDS-PAGE үчүн 80V тегереги төмөн чыңалуудан баштоо сунушталат. Бул баштапкы төмөн чыңалуу үлгүлөрдүн жай жана бир калыпта көчүшүнө мүмкүндүк берет, аларды бөлүүчү гелге киргенде курч тилкеге ​​топтойт.

Үлгүлөр бөлүүчү гелге толук киргенден кийин, чыңалуу 120V чейин көбөйтүлүшү мүмкүн. Бул жогорку чыңалуу протеиндердин молекулалык салмагына жараша эффективдүү бөлүнүшүн камсыз кылуу менен миграцияны тездетет. Бул электрофорез аяктаганын көрсөтүп турат bromophenol көк боёк фронтунун жүрүшүнө мониторинг жүргүзүү үчүн абдан маанилүү болуп саналат. 10-12% концентрациясы бар гелдер үчүн, адатта, 80-90 мүнөт жетиштүү; бирок 15% гелдер үчүн иштөө убактысын бир аз узартышыңыз керек болот.

Убакытты башкаруу: качан токтотууну билүү

Убакыт гел электрофорезинин дагы бир маанилүү фактору болуп саналат. Гельди өтө узун же өтө кыска мөөнөткө иштетүү субоптималдуу бөлүнүүгө алып келиши мүмкүн. Bromophenol көк боёктун миграциясы пайдалуу көрсөткүч болуп саналат: ал гелдин түбүнө жеткенде, адатта, чуркоону токтотууга убакыт келет. Стандарттык гелдер үчүн, мисалы, 10-12%, 80-90 мүнөттүк электрофорездин узактыгы, адатта, адекваттуу. Жогорку пайыздык гелдер үчүн, мисалы, 15%, протеиндердин толук бөлүнүшүн камсыз кылуу үчүн иштөө убактысы узартылышы керек.

Буфер башкаруу: Буферлерди кайра колдонуу жана даярдоо

Электрофорез буферин лабораторияңыздын өзгөчө шарттарына жараша 1-2 жолу кайталап колдонсо болот. Бирок, оптималдуу натыйжаларга жетишүү үчүн, жаңы 10x буферди даярдап, аны колдонуунун алдында суюлтуу сунушталат. Бул буфердин натыйжалуулугун сактап калуусун камсыздайт, бул электрофорездин ишенимдүү натыйжаларына алып келет.

2

Пекин Liuyi Biotechnology гел электрофорез азыктары

Үлгү көлөмүн, чыңалууну жана электрофорез убактысын кылдаттык менен көзөмөлдөө менен, сиз гель электрофорезинин натыйжаларынын тактыгын жана кайталанышын бир топ жакшырта аласыз. Лабораториялык ишиңизде бул эң мыкты тажрыйбаларды ишке ашыруу сизге так жана даана тилкелерге жетишүүгө жардам берип, ылдыйкы анализ үчүн жакшыраак маалыматтарды алып келет.

Эгерде сизде гель электрофорез экспериментин оптималдаштыруунун жакшы ыкмалары болсо, биз менен талкуулоого кош келиңиз!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) өз кесиптик техникалык командасы жана R & D борбору менен 50 жылдан ашуун электрофорез аспаптарын өндүрүү боюнча адистешкен. Бизде дизайндан текшерүүгө жана кампага чейин ишенимдүү жана толук өндүрүш линиясы, ошондой эле маркетингдик колдоо бар. Биздин негизги өнүмдөр - Электрофорез клеткасы (танк/камера), электрофорез энергиясы, көк LED Transilluminator, UV Transilluminator, гель сүрөтү жана анализ системасы ж.б. Биз ошондой эле ПТР инструменти, вортекс аралаштыргыч жана лаборатория үчүн центрифуга сыяктуу лабораториялык шаймандар менен камсыз кылабыз.

Биздин өнүмдөрдү сатып алуу планыңыз болсо, биз менен байланышуудан тартынбаңыз. Сиз бизге электрондук почта аркылуу билдирүү жөнөтө аласыз[email protected]же[email protected], же +86 15810650221 номерине чалыңыз же Whatsapp +86 15810650221, же Wechat: 15810650221 номерин кошуңуз.

Сураныч, Whatsapp же WeChat'ка кошуу үчүн QR кодун сканерлеңиз.

2


Посттун убактысы: 20-август-2024