Принцип
Целлюлоза ацетат пленкасы электрофорез – таяныч катары целлюлоза ацетаты пленкасы колдонулган электрофорез ыкмасы. Электр талаасынын таасири астында заряддалган бөлүкчөлөрдүн карама-каршы электродду көздөй жылышынын кубулушу электрофорез деп аталат. Ар бир белок белгилүү бир изоэлектрдик чекитке ээ болгондуктан, белок рН өзүнүн изоэлектрдик чекитинен төмөн болгон эритмеге салынса, белок оң заряддалып, терс электродду көздөй жылыйт. Тескерисинче, оң уюлга жылат. Электр талаасында кыймылдаган белок молекулаларынын ылдамдыгы алардын зарядына, молекулалардын формасына жана өлчөмүнө байланыштуу болгондуктан, электрофорез аркылуу түрдүү белокторду ажыратууга болот. Сыворотка ар кандай белокторду камтыйт, алардын бардыгында рН7,5 же андан азыраак изоэлектрдик чекиттер бар. Сыворотка электрофорезди жүргүзүү үчүн рН 8,6 буферине жайгаштырылса, бардык сыворотка белоктору терс заряддуу болуп, электр талаасында оң тарапка жылат. Ар кандай сыворотка белоктору бирдей рНда ар кандай зарядга ээ болгондуктан, молекулярдык бөлүкчөлөрдүн өлчөмү ар башка, демек миграция ылдамдыгы да ар башка, алар электрофорез менен бөлүнөт. Сыворотка белокторунун изоэлектрдик чекиттери жана молекулалык салмагы төмөнкү таблицада көрсөтүлгөн:
| Протеин | Изоэлектрдик чекиттер (PI) | Молекулярдык салмак |
| Альбумин | 4.88 | 69 000 |
| α1-глоулин | 5.00 | 200 000 |
| α2-глоулин | 5.06 | 300 000 |
| β-глоулин | 5.12 | 9 000~150 000 |
| γ-глоулин | 6,85~7,50 | 156 000~ 300 000 |
Эксперимент кан сывороткасындагы ар кандай белокторду колдоо каражаты катары целлюлоза ацетаты мембранасы (аббр. CAM) менен бөлүп алуу болуп саналат. CAM көбүктүү лоастардын бир түрүeжакшы формадагы пленка, ал эми калыңдыгы 0,1 мм-1,5 мм, ал белгилүү бир сууну сиңирүүгө ээ.
CAM электрофорези үчүн материалдар, аспаптар жана реагенттер
Үлгүлөр:дени сак адамдын кан сывороткасы
Инструмент:электр менен камсыздоо DYY-6C, электрофорез танк DYCP-38C, жогорку үлгү жүктөө WD-9404
реагенттер
1) целлюлоза ацетаттык кабыкчасы 7X9см
2) PH 8,6 барбитол буфер эритмеси (иондук күч 0,05-0,09, ал 0,06 тид убакыт): 1,84 г диэтил барбитур кислотасын алып, андан кийин 1,03 г диэтил натрий пентобарбиталын алып, эрүү үчүн ысытуу үчүн дистилденген сууну кошуп, 1000 мл чейин;
3) Боёк: Ponceau S 0,2g, Trichloroacetic 3g, 100мл дистилденген суу кошуу;
4) TBS/T же PBS/T: 45мл 95% этанол, 5мл мөңгү уксус кислотасы, 50мл дистилденген суу кошуу;
5) Тазалоочу эритме: 70мл суусуз этанол, 30мл мөңгү уксус кислотасы.
Эксперимент методуd
1) Мембрананы даярдаңыз: мембрананы барбитол буфердик эритмеге 30 мин-8 саатка чөмүлдүрүңүз жана аны чыгарып алыңыз, ашыкча эритмени соргуч кагаз менен алып салыңыз.
2) Үлгүлөрдү жүктөө: кабыкчанын орой жана жылмакай тарабын айырмалап, орой жагындагы үстүнкү учуна чейин 1,5 см аралыкта сызыкты белгилеңиз. Үлгүлөрдү орой жагына жогорку үлгү жүктөө куралы менен жүктөңүз. Эскертүү: Үлгүлөр мембрананын орой жагына жүктөлүшү керек. Сыворотка үлгүлөрү мембранага толук киргенден кийин, мембрананы оодарып, орой тарабын (үлгүлөр менен) резервуарга ылдый каратып коюп, үлгүлөрү бар учу терс электродго салынат.
3) Электрофорез: электр менен жабдууну күйгүзүү, 0,4～0,6м А/см мембрана, иштөө убактысы 30-45 мин. Электрофорезди иштеткенден кийин, электр энергиясын өчүрүңүз.
4) Бою жана тазалоо: Резервуардан мембрананы алып чыгып, сууга чөмүлдүрүңүзit боёк эритмесине 5 мүнөт салып, андан кийин аны тазалоочу эритмеде фондун түсү ачык болгуча 3-4 жолу кайра тазалаңыз. Сыворотка белоктору тилкелерде көрсөтүлүшү керек жана адатта беш зона бар, алар белгиленген сызыктын үстүнкү учунан түзүшөт, Альбумин, α1-глоулин, α2-глоулин, β-глоулин, γ-глоулин.
5) Консервация: кургак электрофорезди коюутоптазалоочу эритмеге 10-15 мүнөт коюп, андан кийин алып чыгып, таза стаканга жабышыңыз, кургагандан кийин тунук пленка болуп калат.топ.
ЭкспериментЖыйынтык
Сыворотка үлгүлөрүнүн бөлүү эффектиси жакшы жана топтун калдыктары жок. Натыйжалардын кайталануучулугу сыноо процедураларына жана экспериментатордун ыкмаларына байланыштуу өзгөрүп турат жана кайталануучулук жогору.
Корутунду
тез клиникалык электрофорез аныктоо системасы (Электрофорез цистернасыDYCP-38C,электр камсыздооDYY-6C жана жогорку үлгүдөгү жүктөө WD-9404) биздин чыгарганкомпания Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdэксперименталдык талаптарга жооп берет,жананатыйжалар кайталануучу, жөнөкөй жана тез, ылайыктууокутууизилдөө.
Пекин ЛюйиBiotechnology Co., Ltd жашоо илими өнөр жайы үчүн электрофорез өнүмдөрүн өндүрүүгө адистешкен.Кытайда 50 жылдан ашык тарыхы бар жана компания бүт дүйнө жүзү боюнча туруктуу жана жогорку сапаттагы өнүмдөрдү камсыз кыла алат. Көп жылдык өнүгүү аркылуу, ал сиздин тандооңузга татыктуу!
Биз азыр өнөктөштөрдү издеп жатабыз, эки OEM электрофорез танк жана дистрибьюторлор тосуп жатышат.
Биз жөнүндө көбүрөөк маалымат алуу үчүн электрондук почта аркылуу биз менен байланышыңыз[email protected]же[email protected].
Посттун убактысы: Ноябр-14-2022