Гель электрофорез ДНКны талдоо үчүн молекулярдык биологияда колдонулган негизги ыкмалардын бири болуп саналат. Бул ыкма ДНКнын фрагменттеринин гель аркылуу миграциясын камтыйт, анда алар өлчөмүнө же формасына жараша бөлүнөт. Бирок, сиз электрофорез эксперименттериңиздин жүрүшүндө, мисалы, агароз гелиндеги тилкелер же гелде тилкелер жок сыяктуу каталарга туш болдуңуз беле? Бул каталардын себеби эмне болушу мүмкүн?
Биздин техниктер сиздин маалыматыңыз үчүн бул жерде көйгөйлөрдү чечүүнүн жуптарын жалпылашты.
1. Агароз гелине сыйпалган тилкелер
●ДНК бузулган. Нуклеаздык булганууну болтурбоо.
● Электрофорез буфери жаңы эмес. Электрофорез буферин көп жолу колдонгондон кийин иондук күч азайып, анын рН мааниси жогорулайт, ошондуктан буфердик сыйымдуулук алсырап, электрофорез эффектине таасирин тийгизет. Электрофорез буферин тез-тез алмаштыруу сунушталат.
● Туура эмес электрофорез шарттары колдонулган. Чыңалуунун 20 В/см ашуусуна жол бербеңиз жана электрофорез учурунда температураны <30°С кармап туруңуз. Гигант ДНК тилкесинин электрофорези үчүн температура <15° C болушу керек. Электрофорез буферинин буфердик сыйымдуулугу жетиштүү экендигин текшериңиз.
● Гельге өтө көп ДНК жүктөлгөн. ДНКнын көлөмүн азайтыңыз.
● ДНКда өтө көп туз. өнүккөн ашыкча туздарды жок кылуу үчүн этанол тундурмасын колдонушат.
● ДНК белок менен булганган. Протеинди алып салуу үчүн фенол экстракцияларын колдонуңуз.
● ДНК денатурацияланган. Электрофорездин алдында ысытууга болбойт. 20 мМ NaCl менен буферде ДНКны суюлтуңуз.
2. Аномалиялар ДНК тилкесинин миграциясы
● λHind III фрагментинин COS сайтынын ренатурациясы. Электрофорездин алдында ДНКны 5 мүнөт 65°Сге чейин ысытып, андан кийин музда 5 мүнөт муздатыңыз.
● Туура эмес электрофорез шарттары колдонулган. Чыңалуунун 20 В/см ашуусуна жол бербеңиз жана электрофорез учурунда температураны <30°С кармап туруңуз. Электрофорез буферинин буфердик сыйымдуулугу жетиштүү экендигин текшериңиз.
● ДНК денатурацияланган. Электрофорездин алдында ысытууга болбойт. 20 мМ NaCl менен буферде ДНКны суюлтуңуз.
3. Агароз гелинде алсыз же такыр жок ДНК тилкелери
● Гельге жүктөлгөн ДНКнын саны же концентрациясы жетишсиз болгон. ДНКнын көлөмүн көбөйтүү. Полиакриламиддик гель электрофорези агароздук электрофорезге караганда бир аз сезгич жана үлгү жүктөө тиешелүү түрдө азайтылышы мүмкүн.
● ДНК бузулган. Нуклеаздык булганууну болтурбоо.
● ДНК гелден электрофорацияланган. Гельди азыраак убакытка электрофорездеңиз, төмөнкү чыңалууну колдонуңуз же жогорку пайыздык гелди колдонуңуз.
● Туура эмес W жарык булагы этидий бромидине боёлгон ДНКны визуалдаштыруу үчүн колдонулган. Кыска толкун узундугу (254 нм) Вт жарыкты көбүрөөк сезгичтик үчүн колдонуңуз.
4. ДНК тилкелери жок
●Кичинекей өлчөмдөгү ДНК гелден электрофорезден өткөрүлдү. Гельди азыраак убакытка электрофорездеңиз, төмөнкү чыңалууну колдонуңуз же жогорку пайыздык гелди колдонуңуз.
● Окшош молекулярдык ДНК тилкелерин айырмалоо кыйын. Электрофорез убактысын көбөйтүп, концентрациясын текшериңизгелдин туура пайызын колдонууга ынануу үчүн.
● ДНК денатурацияланган. Электрофорездин алдында ысытууга болбойт. 20 мМ NaCl менен буферде ДНКны суюлтуңуз.
● ДНК тилкелери абдан чоң жана кадимки гел электрофорези ылайыктуу эмес. Импульстук гелдик электрофорез боюнча талдоо.Агароз гел электрофорези менен дагы кандай көйгөйлөрүңүз бар эле? Биз келечекте гиддер үчүн көбүрөөк изилдейбиз.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) Кытайда электрофорез менен байланышкан өнүмдөрдү багытталган атайын компания болуп саналат. Анын тарыхы 1970-жылы Кытай реформага жана ачылуу мезгилине кире элек кезде башталат. Көп жылдык өнүгүү жолу менен, Liuyi Bitotech өзүнүн брендине ээ, ал электрофорез азыктары үчүн ички рынокто Liuyi бренди катары белгилүү.
Liuyi брендинин Кытайда 50 жылдан ашык тарыхы бар жана компания бүткүл дүйнө жүзү боюнча туруктуу жана сапаттуу өнүмдөрдү бере алат. Көп жылдык өнүгүү аркылуу ал сиздин тандооңузга татыктуу!
Liuyi Biotech горизонталдык электрофорез клеткалары (танктары / камералары) жакшы көрүнүшү менен жогорку сапатта. Гель лотокторунун ар кандай өлчөмдөрү менен, алар ар кандай эксперименталдык талаптарга жооп бере алат. Биздин өзүбүздүн техникалык командабыз жана фабрикабыз бар. Дизайндан баштап өндүрүшкө, чийки заттан негизги бөлүктөргө чейин биз бүт процессти көзөмөлдөй алабыз. DYCP 31 сериясы модель болуп саналган ДНК электрофорези үчүнDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, жанаDYCP-31E. Алардын ортосундагы айырма гел өлчөмү жана баасы болуп саналат. Биз кардарларыбыз үчүн буюмдардын толук өлчөмдөрүн камсыз кылат. модельDYCP-32Cэң чоң гелди 250мм*250мм жасай алат.
Ошол эле учурда, биз электрофорез электр менен жабдууну сунуштайбызDYY-6C,DYY-6DжанаDYY-10Cбиздин электрофорез клеткалары үчүн (цистерналар / камералар) DYCP-31 жана 32 сериялары.
Эгерде сиз өнүмдөр жөнүндө көбүрөөк маалымат алгыңыз келсе, көбүрөөк маалымат алуу үчүн бул веб-сайтка кириңиз жана электрондук почта аркылуу биз менен байланышыңыз жана сиз каалаган нерсеңизди билдириңиз жана биз сиз үчүн чечимдерди бере аларыбызды билиңиз.
Биз жөнүндө көбүрөөк маалымат алуу үчүн электрондук почта аркылуу биз менен байланышыңыз[email protected], [email protected].
Билдирүү убактысы: 09-09-2022